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實時熒光定量PCR儀在運行中需要注意什么

更新時間:2025-08-26      點擊次數(shù):261
實時熒光定量pcr儀是用于熒光測量的儀器。該設(shè)備由熒光定量系統(tǒng)和計算機組成,用來監(jiān)測循環(huán)過程的熒光。與實時設(shè)備相連的計算機收集熒光數(shù)據(jù)。數(shù)據(jù)通過開發(fā)的實時分析軟件以圖表的形式顯示。原始數(shù)據(jù)被繪制成熒光強度相對于循環(huán)數(shù)的圖表。原始數(shù)據(jù)收集后可以開始分析。實時設(shè)備的軟件能使收集到的數(shù)據(jù)進行正常化處理來彌補背景熒光的差異。正常化后可以設(shè)定域值水平,這就是分析熒光數(shù)據(jù)的水平。
采用LED光源設(shè)計,節(jié)能環(huán)保,使用壽命長,免維護。
PC端操作,一臺電腦可控制多臺儀器,可隨時運行多組實驗。
帶有溫度梯度功能,一次可實現(xiàn)12列梯度溫度設(shè)置。
運行中注意事項:
‌板位加載規(guī)范‌:
確保反應板孔位與軟件模板完全匹配(偏移>0.5mm需重新加載)。
使用光學透明封板膜(厚度≤0.1mm)避免熒光信號衰減。
‌程序設(shè)置要點‌:
預變性階段建議95℃10min(確保模板完全變性)。
熔解曲線分析需設(shè)置連續(xù)升溫模式(0.5℃/s)。
維護與質(zhì)控:
‌日常清潔‌:
每周用70%乙醇擦拭樣品艙(避免使用含氯消毒劑)。
每3個月更換散熱風扇濾網(wǎng)。
‌污染防控‌:
實驗分區(qū)操作(前處理區(qū)、擴增區(qū)、分析區(qū)獨立)。
使用含尿嘧啶DNA糖基化酶(UDG)的防污染體系。
 
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